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如何確認(rèn)RNA的質(zhì)量？

樣本種類繁多且復(fù)雜，有些樣本，要想提取到質(zhì)量良好的RNA是非常困難的，那么該如何確認(rèn)RNA的質(zhì)量呢？讓我們一起來看看吧！確認(rèn)RNA的質(zhì)量有以下兩種常見方法1）檢測(cè)RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機(jī)物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0時(shí)，我們認(rèn)為RNA中蛋白或者時(shí)其他有機(jī)物的污染是可以容忍的，不過要注意，當(dāng)你用Tris作為緩沖液檢測(cè)吸光度時(shí)，R值可能會(huì)大于...

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如何提高DNA純度測(cè)定的準(zhǔn)確性？

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常需要對(duì)樣本進(jìn)行濃度和純度的測(cè)定，它相當(dāng)于一種質(zhì)控，以此來確保下游實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可靠。那么該如何提高DNA純度測(cè)定的準(zhǔn)確性呢？讓我們一起來看看吧！常用的DNA濃度/純度測(cè)定設(shè)備是紫外分光光度計(jì)，它的原理是利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析物質(zhì)成分。假設(shè)現(xiàn)在有一樣物質(zhì)A，它溶解在溶液內(nèi)，當(dāng)光照射溶液時(shí)，溶液內(nèi)的A會(huì)吸收一部分的光。不同顏色的光有不同的波長，A對(duì)不同顏色的光（不同波長）的吸收程度是不一樣的。雙鏈的DNA，它能對(duì)波長為260nm的光進(jìn)行強(qiáng)...

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常見的RNA提取方法

不同組織RNA提取原理是將細(xì)胞裂解，釋放出RNA，并通過不同方式去除蛋白，DNA等雜質(zhì)，最終獲得高純度RNA產(chǎn)物的過程。那么你知道常見的RNA提取方法有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、酚氯仿抽提（有機(jī)試劑抽提）原理：將被裂解的生物樣本，混勻離心分相以后，RNA在上層水相，DNA，蛋白質(zhì)在中間層，下層有機(jī)相。收集水相加入乙醇或異丙醇可沉淀RNA，漂洗后得到RNA。優(yōu)點(diǎn)：得率高、可提取到含miRNA和其他小RNA在內(nèi)的總RNA。缺點(diǎn)：用到苯酚、氯仿等有毒試劑。二、硅膠柱法抽提原理...

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如何選擇合適的DNA提取試劑盒？

實(shí)驗(yàn)室工作中，經(jīng)常會(huì)需要用到純化的DNA，這時(shí)我們通常需要使用一個(gè)商業(yè)的DNA提取試劑盒對(duì)目的DNA進(jìn)行分離純化。那么我們?cè)撊绾芜x擇合適的DNA提取試劑盒呢？讓我們一起來看看吧！一、試劑盒組分目前大多數(shù)DNA提取試劑盒遵循相同的基本步驟:裂解，柱純化，洗滌雜質(zhì)，柱洗脫。然而，不同的盒子在完成每個(gè)步驟的方式上有很大的不同。二、使用的樣本類型不同的DNA來源有不同的試劑盒，從實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的細(xì)胞，到臨床樣本，土壤樣本，甚至指紋，也有許多專門用于某些應(yīng)用的試劑盒。例如，土壤中的腐殖酸或...

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DNA提取試劑盒的原理是什么？

如今，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都使用商業(yè)DNA提取試劑盒，這些試劑盒使用硅膠自旋過濾法來獲得高質(zhì)量的DNA。這些可以快速有效地純化DNA（或RNA）。那么DNA提取試劑盒的原理是什么呢？讓我們一起來看看吧！一、RNA和DNA提取裂解：裂解公式可能因您要提取DNA還是RNA而異，但共同點(diǎn)是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。Chaotropes（離液劑）的作用：Chaotrope會(huì)破壞氫鍵及疏水間的相互作用。離液鹽包括鹽酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸鋰。洗滌劑：除了離液劑外，裂解緩沖液中通常還有一...

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